fabgennix IGY-1910說明書

Chicken IgY Purification Kit (10 Egg yolks)

雞 IgY 純化試劑盒

Product no.: IGY-1910

IgY 純化試劑盒 - 如何從蛋黃中純化 IgY 抗體

IGY 的分離和純化步驟簡單且在室溫下進(jìn)行。

1. 新鮮雞蛋被打碎并使用蛋黃分離器分離蛋黃。蛋黃被刺破釋放蛋黃內(nèi)容物，可以使用牙簽輕松去除膜。

2. 對于新鮮蛋黃，在不斷攪拌下加入 5 倍體積的試劑 A 的蛋黃重量。注意：如果蛋黃超過 3 天且未冷凍，建議使用 6 倍體積的試劑 A。不建議使用此試劑盒使用冷凍蛋黃。

3. 加入所有試劑后，會(huì)形成濃稠的黃色沉淀。繼續(xù)攪拌 10 分鐘，并將內(nèi)容物在 4 ° C下孵育過夜。沉淀會(huì)在 1-2 小時(shí)內(nèi)沉淀下來，上清液會(huì)變清。

4. 內(nèi)容物在冷搖擺斗式離心機(jī)中以 3500-4000Xg 在 4 ° C 下離心 30 分鐘。

5. 在預(yù)冷燒杯中倒出澄清的上清液，并在不斷攪拌下緩慢加入等體積的試劑 B。繼續(xù)攪拌 10 分鐘，并將混合物在 4 ° C 下保持 2-4 小時(shí)至過夜。1-2 小時(shí)內(nèi)會(huì)在底部沉淀出清澈的白色沉淀。

6. 將內(nèi)容物在 4°C 下以 4000xg 離心 20 分鐘以收集白色沉淀。

7.  小心地去除所有液體，并使用以下公式在抗體重組緩沖液中重組白色沉淀。對于 10 克蛋黃，添加 2 至 2.5 毫升抗體重組緩沖液。

8. 通過在 280 處測量 1:20 稀釋的 OD，按內(nèi)容定量 IgY。 

9. 總 IgY 可儲(chǔ)存在 1:1 比例的抗體穩(wěn)定緩沖液中，以便在 -40°C 或更低溫度下長期儲(chǔ)存。 

儲(chǔ)藏條件

所有試劑在 4oC 下可穩(wěn)定保存長達(dá) 1 年。 

一般建議

1. 雞蛋可在 4°C 下長期保存，但建議在使用本試劑盒前將其新鮮裂解以分離 IgY。分離后的蛋黃可在 4°C 下在 0.05% 疊氮化納中儲(chǔ)存數(shù)天，而不會(huì)顯著降低 IgY 的回收率。蛋黃不應(yīng)冷凍儲(chǔ)存以用于該試劑盒。

2. 蛋黃中的脂質(zhì)含量變化很大，有時(shí)損壞步驟不會(huì)產(chǎn)生清晰的上清液。在這種情況下，可以再添加一倍體積的試劑 A 以*破壞蛋黃。

本產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷。