arthusbio Alexa Fluor 647抗SAM 1a/b說(shuō)明書(shū)

Alexa Fluor 647-anti-SAM 1a/b

產(chǎn)品名稱(chēng)
Alexa Fluor 647抗SAM 1a/b
目錄號(hào)MAF00201-25/50
描述
Alexa Fluor9647（AF647）共軛抗S腺苷甲硫氨酸單克隆抗體克隆118-6
特異性
MAF00201顯示出與未結(jié)合的小鼠抗SAM單克隆抗體MA00201相同的特異性。

屬性
類(lèi)型
液體
存儲(chǔ)說(shuō)明
在2-8°C的黑暗中儲(chǔ)存，不要冷凍。
濃度
2-4mg/ml，特定批次
存儲(chǔ)緩沖區(qū)
50mM Tris，150mM NaCl，pH8.0，0.2%BSA（Sigma），0.09%NaN3
稀釋液
PBS，pH 7.4，1%胎牛血清或0.5%BSA，0.09%NaN3
純潔
>95%用Sephacryl S-200純化，不含未結(jié)合抗體和Alexa FluorP 647
克隆性
單克隆抗體
克隆編號(hào)
118-6
免疫球蛋白同種型小鼠lgG2b
研究領(lǐng)域
生物分子（DNA、RNA、蛋白質(zhì)、激素、神經(jīng)遞質(zhì)等）的甲基化
單碳代謝
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
新陳代謝
路徑和過(guò)程
巨蟹座
關(guān)節(jié)炎
神經(jīng)變性疾病
動(dòng)脈粥樣硬化
肝臟疾病
腎臟疾病

應(yīng)用
已經(jīng)測(cè)試了MAF00201在以下應(yīng)用中的使用。應(yīng)用說(shuō)明包括推薦和測(cè)試的稀釋液。最佳稀釋度/濃度應(yīng)由最終用戶(hù)根據(jù)測(cè)試環(huán)境和目的確定。

圖1用40μg/ml的AF488抗SAH 301-3（Cat#MAF00301）和8μg/ml的AF647抗SAM 118-6（Cat#MAF00201）對(duì)HepG2和L02細(xì)胞進(jìn)行免疫熒光（IF）染色，然后進(jìn)行DAPI染色，并在激光掃描共聚焦顯微鏡（蔡司LSM 780）下拍攝。（A1-A4）正常肝細(xì)胞系L02細(xì)胞在含有10%FBS的RPMI 1640中培養(yǎng)40h。
不同觀點(diǎn)如下：DAPI（A1）；AF488用于SAH（A2）；SAM的AF647（A3）；所有三個(gè)熒光信號(hào)的重疊（A4）。（B1-B4）肝細(xì)胞癌細(xì)胞系HepG2細(xì)胞培養(yǎng)40小時(shí)。不同觀點(diǎn)如下：DAPI（B1）；AF488用于SAH（B2）；用于SAM（B3）的AF647；所有三個(gè)熒光信號(hào)的重疊（B4）。在L02和HepG2細(xì)胞（x630）之間，SAM和SAH的表達(dá)模式不同。

圖2:36μg/ml下Alexa Fluor9488結(jié)合抗SAH抗體301-3（Cat#MAF00301）和4.5 ug/ml下Alexa Fluorm 647結(jié)合抗SAM抗體118-6（Cat#MAF00201）雙重染色的L02（A1-A3）和HepG2（B1-B3）細(xì)胞的流式細(xì)胞術(shù)。
顏色圖例：
橙色：空白；藍(lán)色：使用核固定/通透性緩沖液（eBioscience 00-5523 FoxP3\uTF染色緩沖液組）；紅色：使用細(xì)胞內(nèi)固定/滲透緩沖液（eBioscience 00-8824）。用細(xì)胞內(nèi)固定/通透性緩沖液（A2，B2）或核固定/通透性緩沖液（A3，B3）固定并通透性融合細(xì)胞（在含10%FBS的RPMI 1640中培養(yǎng)48小時(shí)），然后用上述抗體雙重染色。使用BD-FACSCalibur流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞。
SAM在L02細(xì)胞中的表達(dá)高于HepG2細(xì)胞。SAM和SAH都廣泛表達(dá)，但相當(dāng)動(dòng)態(tài)。兩種細(xì)胞中SAM的水平均高于SAH。

arthusbio MAF00201-25/50