在分子生物學、基因組學以及精準醫療等領域,對核酸(DNA和RNA)進行高效、精準的分離和分析是許多研究與應用的基礎。DNASep™ Cartridge – DNA Separation Column(以下簡稱DNASep™色譜柱)正是為滿足這一需求而設計的一款高性能液相色譜(HPLC)專用分離柱。它以其分辨率、穩定性和廣泛的適用性,成為眾多實驗室進行核酸精細分析的工具之一。
??基礎信息
品牌: ADS Biotec。這是一家專注于為全球生命科學和醫療保健行業提供高質量產品和服務的公司,以其在核酸純化和分析技術方面的專長而聞名。
品名: DNASep™ Cartridge – DNA Separation Column (DNA分離柱)。
貨號: DNA-99-3510
規格: 色譜柱的標準尺寸為 4.6毫米 × 50毫米。其DNA負載能力為 2微克。
??技術原理:無孔聚合物與離子對反相色譜
要理解DNASep™色譜柱的優勢,首先需要了解其核心工作原理。該產品結合了獨特的填料基質和成熟的色譜技術。
1??創新的填料基質:烷基化無孔聚苯乙烯-二乙烯基苯(PS-DVB)共聚物微球
與傳統硅膠基質或多孔聚合物填料不同,DNASep™色譜柱采用了一種經過烷基化處理的無孔PS-DVB共聚物微球作為固定相基質。這一設計帶來了幾大關鍵優勢:
●傳質速度快: 由于填料無孔,核酸分子僅在顆粒表面進行相互作用,避免了進入深孔內部所需的漫長擴散過程。這極大地縮短了分析時間,實現了快速分離。
●分辨率高: 無孔結構消除了因孔深度差異導致的譜帶展寬效應,使峰形更尖銳,從而能夠區分長度差異極小的核酸片段,例如僅相差一個堿基的寡核苷酸(n和n-1分離)。
●穩定性好,壽命長: PS-DVB聚合物具備優異的化學和物理穩定性,能夠耐受高比例的有機溶劑、較寬的pH范圍以及高溫(最高可耐受95°C)。這使得色譜柱在苛刻的色譜條件下仍能保持性能,使用壽命長達數百次進樣分析。
2??分離模式:離子對反相高效液相色譜(IP-RP-HPLC)
DNASep™色譜柱主要用于離子對反相液相色譜模式。其工作流程簡要概括如下:
●流動相: 通常使用含有離子對試劑(如三乙基乙酸銨,TEAA或醋酸己銨,HAA)的乙腈-水溶液作為流動相。
●分離機制: 離子對試劑(如TEAA)的疏水端與固定相的疏水表面結合,而帶正電的銨離子端則與帶負電的核酸磷酸骨架相互作用。在梯度洗脫過程中,隨著乙腈濃度的升高,疏水性較強的長片段核酸會較晚被洗脫,而短片段則先被洗脫。從而實現按核酸片段尺寸(大小) 進行分離。
●關鍵特性: 這種方法的顯著優點是,對雙鏈DNA(dsDNA)片段的尺寸分離在很大程度上與片段的堿基序列及其可能形成的二級結構無關,結果更加穩定和可靠。
? 解決的實驗問題與應用場景
DNASep™色譜柱的高分辨率和高通量特性,使其能夠解決核酸研究中多種復雜的分析難題。
? DNA片段尺寸分析與定量: 這是其最核心的應用之一。無論是雙鏈DNA(dsDNA)還是單鏈DNA(ssDNA)/寡核苷酸(Oligo),該柱都能精確測定其片段大小分布,這對于克隆鑒定、PCR產物分析、下一代測序(NGS)文庫的質量控制(QC)等至關重要。例如,在測序前對模板DNA進行質量控制,需要精確知道片段的大小和濃度。
? 基因突變檢測與基因分型: 基于dHPLC(變性高效液相色譜)原理,DNASep™色譜柱與WAVE™ dHPLC系統等平臺聯用,可高效檢測單核苷酸多態性(SNP)和微小插入/缺失突變。通過部分變性的條件,能夠區分野生型和突變型DNA異源雙鏈分子,在遺傳病篩查、癌癥研究等領域有廣泛應用。其“是/否"檢測模式可以快速判斷特定基因型的存在。
? 核酸純度評估: 該柱能夠有效分離并檢測核酸樣品中的雜質,如引物二聚體、失敗合成序列、酶反應殘留物等,從而對DNA或寡核苷酸樣品的純度進行精確評估。
? 片段回收與下游分析: 與破壞性強的凝膠電泳不同,經HPLC分離后的核酸片段可以被完整地回收。這些高純度的片段可直接用于后續的分子生物學實驗,如靶標驗證、亞克隆、PCR擴增、測序等,大大提高了研究效率。
?? 核心優勢與市場競爭力
綜合來看,DNASep™色譜柱的優勢主要體現在以下幾個方面:
1.優異的性能: 具備出色的靈敏度、分辨率和重現性。其無孔填料技術確保了分析結果的高度準確性。
2.耐用性: 由于其堅固的聚合物基質,該色譜柱使用壽命長,能夠耐受高溫和數百次分析運行,顯著降低了單次分析的成本。
3.廣泛的兼容性: 這些多功能色譜柱不僅可與專用的WAVE™ dHPLC系統配合使用,也適用于其他多種品牌的HPLC系統,為用戶提供了極大的靈活性。
4.成熟的技術與認可: 該產品擁有數以百計的文獻參考資料,證明了其在全球眾多科研實驗室中的廣泛應用和可靠性。ADS Biotec也提供了嚴格的質量控制和完善的技術支持。
?? 客戶群體與訂貨信息
1.目標客戶群體:
DNASep™色譜柱主要服務于以下類型的機構和用戶:
●生物醫學研究機構與大學實驗室: 從事基因組學、轉錄組學、分子生物學基礎研究的科研人員。
●臨床診斷實驗室: 開展遺傳病診斷、腫瘤基因突變檢測等分子檢測項目的醫療機構。
●制藥公司與生物技術公司: 在進行藥物靶點發現、生物標志物驗證、以及治療性寡核苷酸藥物的研發與質控過程中需要高精度核酸分析工具的企業。
●合同研究組織(CROs): 為上述客戶提供研發或檢測服務的機構,需要穩定可靠的平臺技術。
2.訂貨信息與相關產品:
●主產品: 核心產品貨號為 DNA-99-3510(分析型,4.6 x 50 mm)。ADS Biotec還提供其他型號以滿足不同需求,例如通量更高的 DNA-99-3710(DNASep™ HT Cartridge, 6.5 x 37 mm)以及用于RNA工作的 RNA-99-3810(RNASep Prep)和用于寡核苷酸分析的 NUC-99-3550(OligoSep™ Cartridge)等。
●配套試劑: 為獲得最佳分離效果,需要搭配專用的緩沖液,如三乙基乙酸銨(TEAA)溶液(貨號SP5890等)和醋酸己銨(HAA)溶液(貨號SP5892等),以及相應的緩沖液A和B(貨號553421, 553422, 553424, 553425等)。
●采購渠道: 在中國市場,用戶可以通過ADS Bitec的授權代理商(如上海起發實驗試劑有限公司)進行咨詢和采購。具體價格需聯系代理商獲取。
??總結
DNASep™ Cartridge(DNA-99-3510)是一款基于先進無孔PS-DVB聚合物填料技術的高性能核酸分離柱。它通過離子對反相液相色譜技術,為科研和臨床工作者提供了快速、精準、可靠的DNA/RNA尺寸分析、突變檢測、純度評估解決方案。其耐用性、高分辨率以及與多種HPLC系統的廣泛兼容性,使其在生命科學和分子診斷領域占據了重要地位,是進行高水平核酸研究的得力工具。
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(注:本文內容基于品牌公開資料及行業常規信息整理,具體以品牌信息文檔為準。)
??ADS Biotec熱賣產品
貨號 | 品名 | 規格 | 品牌 |
DNA-99-3510 | DNASep Cartridge 4.6 mm x 50 mm, for variety of DNA applications including Sizing and Mutation Detection, load capacity of 2μg | ea | ADS Biotec |
RNA-99-3810 | RNASep Prep for RNA work 7.8 x 50 mm | ea | ADS Biotec |
SP5890 | 2MTEAASolution | 6x200mL | ADS Biotec |
SP5892 | 2M HAA Solution | 6x200mL | ADS Biotec |
553303 | 2MTEAASolution | 200ml | ADS Biotec |
RPC-99-2110 | RNASep™ Semi-Prep for RNA work 21.2 mm x 100 mm | ea | ADS Biotec |
553421 | Triethylammonium Acetate Buffer A – 0.1 M TEAA in Water | Case of 4 x 2.5 liter bottles | ADS Biotec |
706025 | SUREYOR MUTATION KIT S25 | 25T | ADS Biotec |
NUC-99-3550 | OligoSep™ Cartridge – Oligonucleotide Analysis Column | ea | ADS Biotec |
553424 | Hexylammonium Acetate Buffer A – 0.1 M HAA in 10% Acetonitrile | Case of 4x2.5 liter bottles | ADS Biotec |
RPC-99-3015 | RNASep™ Semi-Prep Column | 30mmx150mm | ADS Biotec |
553422 | Mobile Phase for Nucleic Acid Analysis - Buffer B (0.1 M TEAA in 25 9%6 Acetonitrile) | Case (4x2.5L) | ADS Biotec |
553203-L | 2M HAA Solution, up to 4Lper Amber Bottle | amberbottle(upto4L) | ADS Biotec |
553425 | Hexylammonium Acetate Buffer B – 0.1 M HAA in 50% Acetonitrile | 4x2.5L | ADS Biotec |
NUC-99-3860 | OLIGOSep™ Prep HC Column 7.8mmx50mm | 7.8mmx50mm | ADS Biotec |
HCMH-99-003P | HANABI-PIII Plus MetaphaseChromosome Harvester | ea | ADS Biotec |
DNA-99-3710 | DNASep™ HT Cartridge – High Throughput DNA Separation Column 6.5 mm x 37 mm | ea | ADS Biotec |
PC-99-3015 | RNASepM Semi- Prep Il Column | ea | ADS Biotec |
553423 | HPLC Column Wash Solution D, Case (4x2.5L) | 4x2.5L | ADS Biotec |
562001 | HPLC High Range Mutation Standard, 70° C | 180uL | ADS Biotec |
560077 | HPLC Low Range Mutation Standard, 56o C | 180uL | ADS Biotec |
553303-L | 2M TEAA Solution, up to 4L per Amber Bottle | amberbottle(upto 4L) | ADS Biotec |
DNA993510 | DNASEP CARTRIDGE; 4.6 MM X 50 | Each | ADS Biotec |
RNA-99-2110 | RNASep™ Semi-Prep Column | 21.2mmx100mm | ADS Biotec |
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