Protein A Sepharose 4FF 產(chǎn)品使用說明書

——高IgG結(jié)合特異性 高流速 低蛋白A脫落

產(chǎn)品特點

Protein A Sepharose 4FF ，上海起福生物專業(yè)代理，：

 產(chǎn)品介紹

Protein A sepharose介質(zhì)是經(jīng)過我們公司長期開發(fā)，在公司生產(chǎn)的native protein A 的基礎上精致而成。通過Protein A Sepharose 4FF，可分離和純化多種哺乳動物不同亞型的抗體或包含抗體Fc片段的基因工程重組蛋白。本產(chǎn)品相對同類產(chǎn)品具有如下優(yōu)勢：

1、偶聯(lián)條件溫和，更好的保持了protein A的構(gòu)象，所以抗體載量高，同體積的介質(zhì)，相同規(guī)模的純化設備，相同體積介質(zhì)，抗體的產(chǎn)量明顯高于用同類產(chǎn)品，大大的降低了抗體藥物生產(chǎn)成本。

2、非常穩(wěn)定，不易脫落，用其生產(chǎn)的抗體中protein A的殘留比同類產(chǎn)品的更少。

3、公司的Protein A 以及Protein A sepharose的生產(chǎn)都是在清潔車間生產(chǎn)，符合制藥企業(yè)生產(chǎn)需求。

4、公司生產(chǎn)的Protein A sepharose使用壽命長，常規(guī)條件下能夠重復使用100次以上。

使用說明

（1）緩沖液的準備：

（2）樣品的準備

樣品上柱前先用平衡緩沖液稀釋5至10倍，從而確保樣品液的成分和pH與平衡緩沖液相近。如果上樣體積過大，可以采取調(diào)節(jié)上樣液pH和鹽濃度的方式，使樣品的pH和電導與平衡液接近，使樣品中的緩沖體系與平衡緩沖液相同。

細胞培養(yǎng)液中大量的血清蛋白會對親和層析造成一定的干擾，去血清處理或稀釋樣品將提高純化抗體收率。

樣品在上柱前也需0.45μm微孔濾膜過濾。

（3）操作步驟

a） 填料裝柱后，用純水流洗至少3個柱管體積，以沖掉乙醇，再用平衡緩沖液流洗至少5個柱管體積來平衡柱子。

b） 將樣品上柱，上樣流速控制在60cm/h。

c） 平衡緩沖液再洗5-10個柱床體積，把UV洗至基線。

d） 洗脫緩沖液洗脫，收集洗脫峰，立即用中和緩沖液中和到中性。

e） 再生緩沖液流洗3-5個柱床體積。先后用純水、20%乙醇分別流洗3-5個柱床體積。柱子置于+4-8℃保存。

操作中如果沒有在線的蛋白監(jiān)測系統(tǒng)，洗脫峰時可以分階段

收集，zui后根據(jù)測定結(jié)果合并活性部分。

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